Ag NCs와 CRISPR/Cas13a 기반 소수성 종이형 SERS 센서를 이용한 뇌경색 환자 혈청 내 miR-943 검출

WANG Zi-xun ,  

CHEN Le-peng ,  

ZHANG Zhao-han ,  

ZHANG Xu-dong ,  

LI Tian-ran ,  

XU Qiong ,  

YANG Rui-rui ,  

QIAN Ya-yun ,  

摘要

본 연구는 은 나노 큐브(Ag NCs)와 CRISPR/Cas13a 전이 절단 전략에 기반하여 뇌경색(CI) 환자 혈청 내 miR-943 검출을 위한 소수성 종이 기반 SERS 센서를 구축하였다. Ag NCs를 소수성 종이에 조립하여 SERS 기판을 초기 형성하였으며, Ag—S 결합을 통해 Cy5 신호 분자가 수식된 단일 가닥 DNA(ssDNA)를 소수성 종이 SERS 기판에 고정하여 소수성 종이 SERS 센서를 구성하였다. 목표 물질 miR-943가 존재할 때 CRISPR/Cas13a의 전이 절단 능력이 특이적으로 활성화되어 ssDNA를 비특이적으로 절단하며, Cy5가 소수성 종이 SERS 기판 표면에서 멀어져 1468 cm-1 부근의 특성 피크 SERS 강도가 감소한다. 이 센서는 10 amol/L~10 pmol/L 범위에서 우수한 선형 관계를 보이며, 상관 계수 r2=0.986, 검출 한계(LOD)는 1.55×10-17 mol/L에 이르며, 뛰어난 특이성과 재현성을 가진다. 임상 샘플 검출 결과는 실시간 형광 정량 중합효소 연쇄반응(qRT-PCR)과 기본적으로 일치한다. 이 방법은 뇌경색의 조기 비침습 진단을 위한 신뢰할 수 있고 잠재력 있는 검출 방안을 제공한다.

关键词

표면 증강 라만 산란;뇌경색;CRISPR/Cas13a;miRNA;혈청;은 나노 큐브(Ag NCs)

阅读全文