중금속 크롬 단클론 항체 제조 및 면역 분석 방법 확립

LIN Ci ,  

SHU Guang-ping ,  

WANG Qi ,  

YUE Xu-hui ,  

XU Nai-feng ,  

LINGHU Ke-yong ,  

WANG Yuan-feng ,  

摘要

본 논문에서는 중금속 크롬에 대한 단클론 항체를 제조하고, 컬러 라텍스 미립자 면역크로마토그래피를 이용한 신속 검출 방법을 확립하였다. 이소티오시아네이트법을 사용하여 운반 단백질과 완전 항원(면역원 및 코팅원)을 결합하였으며, 면역 쥐를 통해 중금속 크롬을 특이적으로 인식하는 단클론 항체(4G9)를 제작하였다. 결과에 따르면, 단클론 항체 4G9의 반수 억제 농도(IC50)는 21.9 ng/mL였으며, 카드뮴, 납, 수은, 비소, 구리, 철, 니켈 등 중금속과의 교차반응률은 모두 0.3% 미만이었다. 이를 바탕으로 중금속 크롬 컬러 라텍스 미립자 면역크로마토그래피 방법을 구축하였으며, 항체 양, 테스트 스트립의 T선 농도, 프로브 양 및 검출 시스템 pH 값을 최적화하였다. 최적 작업 조건에서 구축된 컬러 라텍스 미립자 면역크로마토그래피 테스트 스트립의 검출 한계(LOD)는 0.95 ng/mL이며, 선형 범위는 0.78~25 ng/mL였다; 실제 아스파라거스 시료에서 LOD는 5.15 ng/mL였고, 첨가 회수율은 75.3%~119%, 상대 표준 편차는 모두 10% 미만으로 실제 시료 내 중금속 크롬 잔류물의 신속 검출에 활용할 수 있다.

关键词

중금속 크롬;단클론 항체;면역크로마토그래피 기술;테스트 스트립

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