핵산 분자 광 스위치를 기반으로 한 시각화된 재조합 효소 중합효소 증폭 검출 방법

DENG Fan ,  

SUN Na-na ,  

ZHOU Kai-yue ,  

LIU Jiang-hua ,  

LI Guo-liang ,  

XU Qin-feng ,  

FENG Xia ,  

摘要

본 연구에서는 핵산 분자 '광 스위치' [Ru(bpy)2(dppz)]2+를 형광 염료로 활용하여 실시간 형광 RPA 증폭에 적용하였으며, 식품 매개 병원균(황색포도상구균(S.aur) 및 살모넬라(S.spp) 등)에 대한 단일 및 다중 실시간 형광 RPA 증폭 검출을 구현하였다. 또한, [Ru(bpy)2(dppz)]2+를 기반으로 한 빠르고 시각화 가능한 RPA 검출 방법을 개발하였으며, 이 방법은 증폭 산물 DNA와 [Ru(bpy)2(dppz)]2+가 결합한 후 가시광선 아래에서 발생하는 강한 빨간 형광 신호를 직접 관찰하여 증폭 결과를 판단함으로써, 높은 농도의 [Ru(bpy)2(dppz)]2+가 증폭 반응에 미치는 뚜렷한 억제를 방지하고 우수한 시각화 검출 효과를 보이며, 높은 특이성과 민감도를 가지고 있어 환경 모니터링, 식품 안전 및 임상 진단 현장에서의 신속한 핵산 검출에 널리 활용될 것으로 기대된다.

关键词

재조합 효소 중합효소 증폭(RPA); [Ru(bpy)2(dppz)]2+; 시각화 검출; 황색포도상구균

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