액체 크로마토그래피-탠덤 질량분석법 기반 혈청 내 37종 아미노산 함량 측정

ZHAO Yun-xia ,  

LI Zi-ying ,  

CHEN Xin ,  

ZHANG Yu-xin ,  

XIAO Wei-min ,  

LIU Ai-ping ,  

LI Mei-fang ,  

JIN Yi-bao ,  

DU Qing-ping ,  

WANG Qi ,  

SU Jia-ting ,  

YANG Guo-wu ,  

FANG Wen ,  

摘要

액체 크로마토그래피-탠덤 질량분석법(LC-MS/MS)을 기반으로 혈청 내 37종 아미노산을 정량 분석하는 방법을 구축하였다. 시료는 10% 설파닐살리실산 수용액으로 단백질을 침전시킨 후, Phenomenex Kinetex F5 컬럼(250 mm×4.6 mm, 5 μm)을 사용해 분리하였으며, 0.02% 포름산 수용액-아세토니트릴을 이동상으로 그라디언트 용출하였다. 전기 분무 이온원(ESI) 양이온 모드 및 다중 반응 모니터링(MRM) 모드에서 검출하였다. 방법학 검증 결과, 37종 아미노산은 검출 한계부터 1,000 ng/mL 범위 내에서 우수한 직선성을 보였으며 상관계수는 모두 0.999 이상이었다. 유지시간은 4.60~9.16분, 검출 한계는 0.2~10.0 ng/mL, 정량 하한은 0.5~20.0 ng/mL였고, 다양한 첨가 농도에서 평균 회수율은 83.2%~118%, 상대 표준편차는 0.90%~9.4%였다. 이 방법을 통해 49개의 혈청 샘플을 분석하였으며 카르노신과 시스테인이 검출되지 않았고, 호모시스테인의 검출율은 10.20%, 나머지 34종 아미노산의 검출율은 90% 이상이었다. 본 방법은 높은 정확도, 민감도 및 특이성을 가지며 혈청 샘플 내 아미노산 함량 측정에 활용 가능하며, 아미노산 대사 이상과 관련된 질병에 대한 보다 포괄적인 검출 데이터를 제공한다.

关键词

액체 크로마토그래피-탠덤 질량분석법;아미노산;혈청;설파닐살리실산

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