전통적인 지수 증폭법에서는 목표 핵산과 대칭 증폭 주형의 양 끝단 에너지가 동일하지만, 목표 핵산이 주형의 5’ 말단과 혼성화될 때 증폭이 어렵게 시작되어 미량 목표 핵산 분석이 제한된다. 본 논문에서는 비대칭 혼성 유도 이성 온도 지수 증폭(AEXPRA) 전략을 개발하여 microRNA의 고감도, 신속한 분석에 적용하였다. miR-196b를 표적으로 하여 설계된 비대칭 증폭 주형을 기반으로, 목표물은 증폭 주형의 3’ 말단과 완전 상보적이지만 5’ 말단과는 부분 상보적이므로 miR-196b는 증폭 주형의 3’ 말단에 완전히 혼성화될 수 있다. 이 방법은 높은 감도, 특이성 및 빠른 속도를 가진다. 전체 반응 시간은 30분 이내이며, 0.42 amol/L까지 miR-196b를 검출할 수 있다. 방법의 실용성을 검증하기 위해 혈청 추출물에서 miR-196b 분석에 적용하였으며, 비소세포암 환자와 정상인 혈청 사이의 miR-196b 발현을 효과적으로 구분할 수 있었고 결과는 실시간 정량 PCR(RT-qPCR)과 일치하였다. 이 방법은 높은 정확도와 신뢰성을 가지며, miRNA의 임상 진단 및 병리학 연구에서 중요한 역할을 할 것으로 기대된다.

이성 온도 지수 증폭;마이크로RNA;형광 검출;질병 진단