알칼리성 메탄올 용액을 이용한 초음파 추출과 아몬드 유래 β-글루코시다아제 가수분해 및 폴리아미드 분산 고상 추출 단계를 결합하여 대두 이소플라본 활성 총량을 초고성능 액체크로마토그래피로 측정하는 방법을 확립하였다. 시료 내의 말로닐 및 아세틸형 대두 이소플라본 배당체는 알칼리성 조건에서 기본형 배당체로 가수분해되며, β-글루코시다아제의 작용으로 당기가 제거되어 해당 아글리콘으로 전환된다. 시료 내 12가지 서로 다른 형태의 대두 이소플라본이 3가지 이소플라본 아글리콘(다이드제인, 제니스테인, 글리시틴)으로 전환된 후 폴리아미드 분말을 이용한 분산 고상 추출 및 C18 역상 크로마토그래피 칼럼(2.1 mm i.d.×50 mm, 1.8 µm)으로 분리된다. 결과는 다이드제인, 제니스테인 및 글리시틴이 3분 내에 기준선 분리가 이루어지며, 3종 이소플라본 아글리콘의 표준곡선 상관계수(r2)가 0.999 이상이고, 총 이소플라본 회수율이 94.3%~102%, 상대 표준편차(RSD, n=6)가 5.0% 미만으로 높은 정확도와 정밀도를 나타냈다. 이 방법은 시료 내 모든 아글리콘을 검출하여 이소플라본 총량을 계산함으로써 분리도, 정확도 및 검출 비용과 관련된 난제를 줄이는 데 기여한다. 체내 이소플라본의 전환 흡수 기전 및 생리적 효과를 고려할 때 아글리콘 총량으로 산정하는 것이 실제 이소플라본 활성 수준을 보다 과학적으로 반영하여 배당체와 아글리콘의 단순 합산에 의한 이소플라본 함량 고평가를 방지한다.

대두 이소플라본;폴리아미드(PA);분산 고상 추출(d-SPE);β-글루코시다아제;초고성능 액체크로마토그래피(UPLC)