電気活性ニッケルフェロシアニドおよび金属模倣酵素協同触媒によるタンパク質電気化学検出

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摘要

本論文では、金属ナノ模倣酵素の協同触媒によって不溶性沈殿物を生成する「シグナルオフ」型電気化学免疫センサーを設計し、超高感度なアルファフェトプロテイン(AFP)の検出を実現した。サンドイッチ免疫法により、過酸化物酵素活性を有する二次抗体コンジュゲートである中空金-白金-パラジウムナノ粒子(HAuNPs-PtPdNPs-Ab2)を、電気活性物質であるニッケルフェロシアニドナノ粒子修飾電極に固定化した。H2O2存在下で、AFPに捕獲された二次抗体コンジュゲート中のHAuNPsおよびPtPdNPsが過酸化物酵素模倣酵素として4-クロロ-1-ナフトール(4-CN)を触媒し、電極界面に不溶かつ非導電性のベンゼン-4-クロロヘキサジエノン(4-CD)沈殿物を生成し、電子伝達を効果的に阻害し、電気化学信号が著しく低下しAFPの定量検出に利用される。実験により、本センサーは0.1 pg/mL〜200 ng/mLのAFPに対し良好な検出直線性を示し、検出限界(S/N=3)は33 fg/mLであった。本触媒戦略は協同触媒効果を有し、センシングの感度向上のための新しい多重信号増幅法を提供できる。

关键词

協同触媒作用;電気化学免疫センサー;金属ナノ材料;模倣酵素

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