ガスクロマトグラフィー-質量分析法による血漿中31種類遊離脂肪酸の定量

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摘要

ガスクロマトグラフィー-質量分析法(GC-MS)を用いて血漿中の31種類の遊離脂肪酸(FFAs)含有量を検出する分析法を確立した。FFAsの抽出濃縮および誘導体化法を比較・最適化した結果、抽出溶媒としてクロロホルム:メタノール(体積比1:2)を用い、誘導体化法として酢酸クロリド法を採用した。結果は、31種類のFFAsがそれぞれの濃度範囲内で良好な直線性を示し、相関係数(r)は0.9990以上であった。検出限界(LOD、S/N≥3)および定量下限(LOQ、S/N≥10)はそれぞれ0.010~0.050 μg/mLおよび0.034~0.167 μg/mLであった。C13:0およびC23:0をターゲットとし、方法学的検証を行った。血漿QCサンプルの回収率は86.3%~115%、相対標準偏差(RSD、n=6)は9.6%以下、日内RSD(n=6)は6.3%以下、日間RSD(n=3)は7.8%以下であった。この方法を妊婦の血漿49検体のFFAs含有量測定に適用し、21~31種類のFFAsを検出した。その中で、C16:0(パルミチン酸)、C18:2n6c(リノール酸)、C18:1n9c(オレイン酸)およびC18:0(ステアリン酸)が妊婦血漿中の主要なFFAsであった。本法はより多くのFFAsの種類を検出でき、必要なサンプル量が少なく、LODおよびLOQが低く、定性および定量が正確であり、血漿中のFFAs分析に利用できる。

关键词

遊離脂肪酸; ガスクロマトグラフィー-質量分析; 誘導体化; 血漿

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