水体、底泥、魚体の自然比率の皮下筋肉およびエビ筋肉中のクロルニルラミン（NIC）残留量測定のための同位体希釈高性能液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法（HPLC-MS/MS）を確立した。水試料はアルカリ処理後に酢酸エチルで抽出し、他の試料は0.1%アンモニア水アセトニトリルで抽出し、C18粉末で試料を精製した。移動相はアセトニトリル-水を使用し、流速は0.3 mL/min、Thermo Hypersil Gold C18（150 mm×2.1 mm、5 μm）カラムで分離を行った。クロルニルラミン安定同位体標識物（クロルニルラミン-13C6）を内標として用い、選択反応モニタリング（SRM）モードでスキャンし、内標法で定量した。結果は、クロルニルラミンが0.2〜200 μg/Lの範囲で良好な直線性を示し、相関係数（r2）は0.9995以上であった。ブランク水試料の2.5、25、250 ng/Lの添加レベルでの平均回収率は90.5%〜109%、相対標準偏差（RSD）は3.2%〜11%、検出限界（LOD）は1.0 ng/L、定量限界（LOQ）は2.5 ng/Lであった；ブランク底泥、キビレハゼの自然比率帯皮下筋肉、およびクレイフィッシュ筋肉の0.5、5.0、50 μg/kgの添加レベルでの平均回収率はそれぞれ89.4%〜113%、92.8%〜110%、94.1%〜107%、RSDは4.6%〜12%、2.8%〜11%、3.2%〜9.3%、LODはいずれも0.2 μg/kg、LOQはいずれも0.5 μg/kgであった。本法は感度、精度および選択性が高く、実際の養殖環境の水体、底泥、魚及びエビ中のクロルニルラミン残留分析に適している。

同位体希釈;クロルニルラミン;水体;底泥;魚;エビ;高性能液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法