豚肝臓中のエンラマイシン残留量を迅速に測定する液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法

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摘要

豚肝臓中のエンラマイシン残留量を迅速に測定するための液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法(LC-MS/MS)を確立した。豚肝臓試料は0.1 mol/L塩酸-アセトニトリル(3:7、体積比)で2回抽出し、遠心分離して上清を回収した後、酢酸エチルおよびn-ヘキサンを加えて液液抽出により精製した。遠心分離後に層分離し、下層の抽出液を0.1%ギ酸で希釈定容してLC-MS/MS解析を行った。Acquity BEH C18カラム(100 mm×2.1 mm、1.7 μm)を用いてクロマトグラフィー分離を実施し、移動相は0.1%ギ酸溶液-メタノールのグラジエント溶出を用いた。質量分析はエレクトロスプレー正イオン(ESI+)モードイオン化を採用し、多重反応モニタリング(MRM)モードでデータを取得し、マトリックス補正外部標準法で定量した。エンラマイシンAおよびBのマトリックス標準溶液は2.0〜500 μg/Lの質量濃度範囲で定量イオンのピーク面積と良好な直線性を示し、検出限界はそれぞれ3.0、4.0 μg/kg、定量下限はそれぞれ10、12 μg/kgであった。空白豚肝臓の被検体回収率は80.8%〜90.3%、バッチ内相対標準偏差(RSD)は0.90%〜4.5%、バッチ間RSDは3.0%〜4.3%であった。従来の方法と比較して、本法は簡単かつ迅速で、精度と再現性に優れ、動物組織中のエンラマイシン残留量分析ニーズを満たすことができる。

关键词

豚肝臓;エンラマイシン;液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法;残留量

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