ヒト血清中の3種類の脂溶性ビタミンの検出を例に、ヒト内因性代謝物に対する分析方法を検討した。液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法(LC-MS/MS)を用いてヒト血清中のビタミンA、ビタミンD3およびビタミンEを検出し、混合ヒト血清マトリックスに標準品および内部標準を添加して内因性物質のバックグラウンドを差し引く方法、およびウシ血清アルブミン(BSA)を模擬マトリックスとした標準添加法により標準曲線を作成して定量分析を行った。結果は、混合ヒト血清マトリックスを用いた方法におけるビタミンA、ビタミンD3およびビタミンEの検出限界がそれぞれ4.2、0.8、67.2 ng/mL、定量下限がそれぞれ13.7、2.6、221.9 ng/mLであることを示した。両方法の線形相関係数は共に0.996を超え、実試料の低・高添加濃度における回収率は90.7%〜112%、相対標準偏差(RSD)は1.0%〜4.5%であり、高い精度と再現性を有していた。40検体の未知サンプル検出結果では、両方法に統計学的差異は認められなかった。したがって、ヒト内因性代謝物に対して混合ヒト血清マトリックスのバックグラウンド差し引き法を用いることで、標準品と試料のマトリックス一致を実現した正確な分析が可能となり、臨床関連疾患の迅速な診断に資する。

脂溶性ビタミン;液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法(LC-MS/MS);内因性代謝物;ヒト血清マトリックス