分散固相抽出精製／液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法（dSPE/LC-MS/MS）を用いて、ローヤルゼリー中のジメチルホルムアミド、モノメチルホルムアミド（DMPF）およびそれらの代謝物である2,4-ジメチルベンズアミド（DMF）と2,4-ジメチルアニリン（DMA）残留量を測定する方法を確立した。試料は緩衝液（pH 9.0）で希釈し、アセトニトリルおよび塩化ナトリウムによってタンパク質を沈殿させ、塩析抽出を行い、N-プロピルエチレンジアミン（PSA）、C18および無水硫酸マグネシウムを用いて分散固相抽出で精製した。精製液を0.22 μmフィルターでろ過した後、Agilent Eclipse XDB-C18カラム（150 mm×4.6 mm、5 μm）を用いて0.15%蟻酸水溶液-アセトニトリルを移動相としたグラジエント溶出で分離し、エレクトロスプレーイオン化正イオンモードにより多反応モニタリングモードで検出し、アイソトープ内標準法により定量した。結果は、ジメチルホルムアミド、DMPF、DMFおよびDMAの直線範囲が0～100 μg/kgであり、相関係数（r）は0.996以上、定量限界（S/N=10）はそれぞれ0.10、0.25、5.0、2.5 μg/kgであった。空のローヤルゼリーを用いたスパイク回収試験では、5、10、20 μg/kgの濃度レベルで回収率が77.0～107％、相対標準偏差が2.0～11％であった。本方法は簡便かつ迅速であり、ローヤルゼリー中のジメチルホルムアミド、DMPFおよび代謝物の残留量を同時に測定するのに適していることが示された。

ローヤルゼリー;ジメチルホルムアミド;モノメチルホルムアミド;代謝物;液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法;分散固相抽出