超高性能液体クロマトグラフィー-イオントラップ-飛行時間質量分析計(UPLC-IT-TOF MS)を用いた非標的代謝オミクス法を確立し、ヒト慢性骨髄性白血病細胞およびそのアドリアマイシン耐性細胞(K562およびK562-ADM)間の代謝物差異を検討した。細胞破砕方法、抽出溶媒系および溶媒量が細胞代謝物の抽出効率に与える影響を調査したところ、超音波破砕法を用い、80%メタノール800 μLで抽出した場合に多くの代謝特徴ピークが得られ、方法の再現性および安定性が高かった。確立した方法をK562およびK562-ADM細胞の代謝オミクス差異研究に適用し、得られたデータに主成分分析(PCA)および直交部分最小二乗判別分析(OPLS-DA)を実施した。結果は2種類の細胞間で代謝特徴に有意な差異を示し、分類に有意に寄与する40種類の代謝物を同定した。これらの差異代謝物は主にアミノ酸代謝、スフィンゴ脂質代謝、プリン代謝およびピリミジン代謝経路に関与していた。本手法はK562およびK562-ADM細胞の代謝オミクス差異研究に利用可能であり、白血病細胞の薬剤耐性に関する代謝オミクス研究に寄与することが期待される。

白血病細胞; 非標的代謝オミクス; 超高性能液体クロマトグラフィー-質量分析計連携; アドリアマイシン耐性