超高効率液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法（UPLC-MS/MS）を用いてヒト血清中のプロゲステロンを測定する分析方法を確立した。血清サンプルは酢酸エチルおよび正ヘキサンを用いた液液抽出（LLE）により処理し、Acquity UPLC BEH C18カラム（2.1 mm×100 mm、1.7 μm）を用いてグラジエント分離を行った。クロマトグラフィーの走行時間は5分であり、エレクトロスプレーイオン化（ESI）陽イオンモードおよび多重反応監視（MRM）スキャンモードを採用し、同位体内標準法により定量を行った。2段階抽出法がプロゲステロンの抽出に及ぼす影響、異なる移動相による分離効果、試料の安定性を検討した結果、メタノール−0.1%アンモニア水溶液を移動相とした場合に分離効果が良好であった。最適条件下でプロゲステロンは10〜10,000 pg/mLの範囲で良好な直線性（r2=0.9998）を示し、検出限界および定量下限はそれぞれ5、10 pg/mLであった。平均付加回収率は91.5%〜106%、日内相対標準偏差（RSD）は1.2%〜8.2%、日間RSDは4.1%〜9.1%であった。本法を用いて30件の実血清サンプルを測定した結果、プロゲステロンの質量濃度は0.0502〜1.3635 ng/mLであり、すべて正常な生理的範囲内であった。本法は高感度であり、正確かつ信頼性が高く、臨床血清サンプル中のプロゲステロンの生理学的レベルの検出に利用できる。

プロゲステロン; 同位体希釈; 超高効率液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法(UPLC-MS/MS); 液液抽出(LLE); 血清