オフライン二次元クロマトグラフィーと糖苷外切酵素分析に基づき、効率的で信頼性の高い糖タンパク質N-糖鎖の構造同定法が確立された。まず、弱陰イオン交換クロマトグラフィーを用いて異なるシアル酸含量の糖鎖を調製し、その後レーザー誘導キャピラリー電気泳動（CE-LIF）と糖苷外切酵素を組み合わせて糖鎖構造の同定を行った。分離・調製された糖鎖を蛍光標識し、トップダウン消化（top-down digestion）およびボトムアップ同定（bottom-up identification）を実施し、IgG中の18種類の糖型を検出した。本手法をさらにヒト血清中のN-糖鎖解析に適用したところ、異なるシアル酸化程度の糖鎖の相対量はS1∶S2∶S3∶S4=4.7∶20.9∶6∶1であった。結果は、ヒト血清中の高豊富な中性糖鎖がIgGの中性糖鎖構造に非常に類似しており、血清中で最も豊富なN-糖型はジシアル化された二分枝糖型FA2G2S2であることを示している。本方法は糖タンパク質N-糖鎖の構造解析に一定の応用可能性を有する。

オフライン二次元クロマトグラフィー; キャピラリー電気泳動; 免疫グロブリンG; N-糖鎖; ヒト血清