酸化グラフェン基質キャピラリー電気クロマトグラフィートリプシンマイクロリアクターの性能研究

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摘要

優れた物理化学的特性を持つグラフェンに基づき、層ごとの組み立て法を用いて酸化グラフェンを石英キャピラリーの内壁に修飾し、酸化グラフェン基質のキャピラリー電気クロマトグラフィーを調製し、電気浸透流やラマンスペクトルなどで特性評価を行った。この基盤の上で、イオン結合法によりトリプシンをキャピラリー電気クロマトグラフィーカラムの先端に固定化し、トリプシンマイクロリアクターを調製した。これらの組み合わせによりキャピラリー電気クロマトグラフィートリプシンマイクロリアクターを構成した。実験結果は、酸化グラフェンが基質として試料の分離効率を向上させるだけでなく、トリプシンの触媒性能を促進することを示した。酸化グラフェン修飾キャピラリー電気クロマトグラフィーは、N-ベンゾイル-L-アルギニンエチルエステル塩酸塩(BAEE)とN-ベンゾイル-L-アルギニン(BA)の混合物の分離度を裸キャピラリーの3.70から4.71に向上させ、その固定化酵素活性(ミカエリス定数Km=1.10 mmol/L、最大反応速度Vmax=0.32 mmol/L/s)も裸キャピラリー(Km=109.77 mmol/L、Vmax=0.00046 mmol/L/s)に比べ著しく優れていた。本調製したマイクロリアクターを用いて10種類の漢方薬からトリプシン阻害活性成分をスクリーニングし、三七および大黄にトリプシン阻害活性成分が存在することを確認した。

关键词

酵素マイクロリアクター;酸化グラフェン;キャピラリー電気クロマトグラフィー;トリプシン;阻害剤

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