本研究では、逆相クロマトグラフィーと混合モードクロマトグラフィーを組み合わせたセントラルカット二次元液体クロマトグラフィー-単一四重極質量分析計（2D-LC-MS）連携分析法を確立し、7種類の中成薬中のアリストロキ酸-Ⅰ（Aristolochic acid I、AA-Ⅰ）の含量測定を行った。一次分離にはChromCore AR C₁₈逆相クロマトグラフィーカラムを用い、アセトニトリル‐0.05%リン酸水溶液を移動相としたグラジエント溶出を行い、目的成分AA-Ⅰをオンラインでカットし、逆相/弱い陰イオン交換（RP/WAX）混合モード捕集カラムに濃縮した。二次分離にはRP/WAX混合モード分析カラムを用い、アセトニトリル‐100 mmol/L酢酸アンモニウム緩衝液（pH 3.9）を移動相としたグラジエント溶出を行った。質量分析検出は電気噴霧正イオン選択イオンモニタリング（ESI⁺-SIM）モードで行い、モニターイオンはm/z 359およびm/z 298であった。結果は、各中成薬試料中のAA-Ⅰのクロマトグラムピークがマトリックス干渉物質と良好に分離され、2〜100 ng/mLの濃度範囲で良好な直線性を示し、相関係数r=0.9997であった。信号対雑音比S/N=3およびS/N=10で検出限界（LOD）と定量限界（LOQ）をそれぞれ算出し、結果はそれぞれ0.13 ng/mLおよび0.44 ng/mLであった。平均標準添加回収率は100.4%であった。以上より、本法は特異性が高く感度に優れ、定量が正確かつ信頼性が高いため、中成薬中のAA-Ⅰのスクリーニングおよび定量に適用可能である。

アリストロキ酸-Ⅰ;混合モードクロマトグラフィー;二次元液体クロマトグラフィー;細辛;単四重極質量分析計;中成薬