本研究では、動的光散乱（DLS）を用いた簡便で低コストかつ高感度なセンサーシステムを、新規に構築し、切込み酵素を基盤とした鎖置換増幅（NESDA）技術と組み合わせることで、黄曲霉毒素M1（AFM1）の検出を実現した。AFM1が存在する場合、AFM1アプタマーを含む配列がプライマーDNAと部分的にハイブリッドし、NESDA反応を誘導して大量の一本鎖DNA（ssDNA）を生成する。生成された一本鎖DNAは金ナノ粒子-DNAプローブとハイブリッドし、金ナノ粒子の凝集を引き起こし、それに伴い平均流体力学直径が増大する。この変化はDLSを介して検出され、定量分析が可能である。検出性能を向上させるために、NESDA反応温度、インキュベーション時間、テンプレートDNA濃度、ポリメラーゼおよび切込み酵素の添加量といった主要パラメーターが検出信号に及ぼす影響を体系的に検討した。実験結果から、最適条件下で金ナノ粒子の平均粒径はAFM1濃度（8.3～1000 pmol/L）の範囲で良好な線形関係を示し、検出限界は1.3 pmol/Lに達した。提案法は市販の牛乳サンプル中のAFM1検出に成功し、回収率は94.3%～107%であり、実用性の高い信頼性を示すとともに、将来的な食品安全評価への広範な応用可能性を有することが確認された。

黄曲霉毒素M1; 鎖置換増幅技術; 動的光散乱技術; 切込み酵素; 金ナノ粒子; 牛乳