T7 RNAポリメラーゼ変異体に基づくDNAシグナル出力型無細胞バイオセンサーシステム

LAI Ru-hui ,  

SHU Liu ,  

HUANG Yan ,  

NIE Zhou ,  

LEI Chun-yang ,  

摘要

本研究は、シグナルキャリアパラダイム変換に基づく無細胞バイオセンサーの新しい戦略を提案する。dNTPを効率的に利用して一本鎖DNAを合成できるT7 RNAポリメラーゼ変異体QMF-M6を、アロステリック転写因子(aTF)を中心とした転写調節システムに導入することで、RNAシグナルキャリアから安定したDNAレポーター分子への転換を実現し、センシングシステムの堅牢性および耐妨害性を著しく向上させた。実験結果は、本プラットフォームがテトラサイクリンおよび銅イオンに対して優れた検出性能を示し、それぞれ検出限界は0.62 μmol/Lおよび26 nmol/Lに達し、環境水試料中の銅イオン添加回収実験において良好な適用性を示したことを示している。本研究は、レポーターシステムの不安定性を解決するDNAシグナル出力戦略を提案し、現場モニタリングや即時診断などの応用に適した堅牢な無細胞バイオセンサーシステムの開発に向けた実現可能な技術的道筋を提供する。

关键词

無細胞バイオセンサー;アロステリック転写因子;T7 RNAポリメラーゼ;DNA

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