高効率キャピラリー電気泳動技術に基づくHRAS遺伝子分子分析法の研究

SHU Meng-long ,  

YU Yang ,  

LIU Chang ,  

FENG Liang-jie ,  

SUN Yu ,  

YANG Jing ,  

WANG Feng-chao ,  

CHEN Jin ,  

摘要

HRAS遺伝子断片の変異状態は、多くの人体がんの早期スクリーニングおよび治療と密接に関連しています。本論文は、実験室で独自に構築した高効率キャピラリー電気泳動システムと空間内定量分析法（SDIS）を組み合わせ、その信頼性、安定性および正確性を検証した上で、HRAS遺伝子の11、12コドン断片の同時検出および解析を成功させました。結果は、分離媒質（HEC、1 300 K）濃度1.0％、分離電界強度100 V/cmの条件下で、2つの遺伝子断片が6分以内に良好なベースライン分離を実現し、システム検出の相対標準偏差が2.5％以下であることを示しています。2つの断片の検出濃度は良好な線形関係を示し（相関係数（r²）は0.95以上）、検出限界（LOD）はそれぞれ0.059 ng/μLおよび0.061 ng/μLです。従来のリアルタイム定量PCR（qPCR）およびシーケンシング技術と比較して、本自作システムはコスト、分析時間、機器の携帯性に優れており、SDIS法を融合することでHRAS遺伝子断片の高感度ターゲット分析を実現しています。

关键词

高効率キャピラリー電気泳動;HRAS遺伝子;SDIS法;遺伝子変異検出

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