Ag NCsおよびCRISPR/Cas13aに基づく疎水性紙基SERSセンサーによる脳梗塞患者血清中miR-943の検出

WANG Zi-xun ,  

CHEN Le-peng ,  

ZHANG Zhao-han ,  

ZHANG Xu-dong ,  

LI Tian-ran ,  

XU Qiong ,  

YANG Rui-rui ,  

QIAN Ya-yun ,  

摘要

本研究は銀ナノキューブ(Ag NCs)およびCRISPR/Cas13aのトランス切断戦略に基づき、脳梗塞(CI)患者の血清中miR-943を検出するための疎水性紙基SERSセンサーを構築した。Ag NCsを疎水性紙上に組み立ててSERS基板を初期構築し、Cy5信号分子で修飾された一本鎖DNA(ssDNA)をAg—S結合により疎水性紙SERS基板に固定し、疎水性紙SERSセンサーを作製した。ターゲット物質miR-943存在時にはCRISPR/Cas13aのトランス切断活性が特異的に活性化され、非特異的にssDNAを切断し、Cy5が疎水性紙SERS基板表面から離れ、1468 cm^-1におけるCy5の特徴的なピークSERS強度が減少する。このセンサーは10 amol/Lから10 pmol/Lの範囲で良好な線形関係を示し、相関係数r^2=0.986、検出限界(LOD)は1.55×10^-17 mol/Lに達し、優れた特異性と再現性を持つ。臨床サンプルの検出結果はリアルタイム蛍光定量PCR(qRT-PCR)とほぼ一致した。本手法は脳梗塞の早期非侵襲診断に対して信頼性が高く極めて有望な検出方法を提供する。

关键词

表面増強ラマン散乱;脳梗塞;CRISPR/Cas13a;miRNA;血清;銀ナノキューブ(Ag NCs)

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