重金属クロムモノクローナル抗体の調製および免疫分析法の確立

LIN Ci ,  

SHU Guang-ping ,  

WANG Qi ,  

YUE Xu-hui ,  

XU Nai-feng ,  

LINGHU Ke-yong ,  

WANG Yuan-feng ,  

摘要

本論文では、重金属クロムに対するモノクローナル抗体を調製し、カラーラテックス微粒子免疫クロマトグラフィーを用いた迅速検出法を確立した。イソチオシアネート法を用いてキャリアタンパク質と完全抗原(免疫原および被覆原)をそれぞれ共役合成し、免疫マウスから重金属クロムを特異的に認識するモノクローナル抗体(4G9)を作製した。結果は、モノクローナル抗体4G9の半数抑制濃度(IC50)が21.9 ng/mLであり、カドミウム、鉛、水銀、ヒ素、銅、鉄、ニッケルなどの重金属との交差反応率はいずれも0.3%未満であったことを示した。これに基づき、重金属クロムのカラーラテックス微粒子免疫クロマトグラフィー法を確立し、抗体量、試験紙のTライン濃度、プローブ量、および検出系のpHを最適化した。最適な作業条件下で構築したカラーラテックス微粒子免疫クロマトグラフィー試験紙の検出限界(LOD)は0.95 ng/mLであり、直線範囲は0.78〜25 ng/mLであった。実際のアスパラガス試料中のLODは5.15 ng/mLで、スパイク回収率は75.3%〜119%、相対標準偏差はいずれも10%未満であり、実試料中の重金属クロム残留の迅速検出に利用可能である。

关键词

重金属クロム;モノクローナル抗体;免疫クロマトグラフィー技術;試験紙

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