超高性能液体クロマトグラフィー-高分解能質量分析法による血清中26種類胆汁酸の定量分析

GUO Min ,  

ZHANG Zhi-hua ,  

YANG Qin ,  

WANG Gang ,  

WANG Lin-lin ,  

ZHAO Jian-xin ,  

摘要

本研究では、超高性能液体クロマトグラフィー-高分解能質量分析法(UPLC-HRMS)を組み合わせて、血清中の26種類の胆汁酸を分析する方法を確立した。血清サンプルはタンパク質沈殿前処理を施し、Phenomenex Kinetex C18カラム(2.1 mm×100 mm、2.6 μm)を用いて分離した。5 mmol/L酢酸アンモニウム水溶液およびメタノールを移動相とした勾配溶出を行い、エレクトロスプレー負イオンモードでデータを収集し、外部標準法にて定量した。方法論の検証により、26種類の胆汁酸は0.04~1,163.5 ng/mLの範囲で良好な直線性を示し、相関係数(r2)はすべて0.9990以上であった。検出下限は0.01~0.86 ng/mL、定量下限は0.04~2.22 μg/mLであり、添加回収率は68.1%~99.8%、相対標準偏差は0.10%~10%であった。この方法は、異なる由来の血清サンプル中の胆汁酸含有量を正確に検出するのに適しており、胆汁酸代謝メカニズムの研究および関連疾患のバイオマーカー選定に信頼できる方法論的支援を提供する。

关键词

血清;胆汁酸;UPLC-HRMS;定量分析

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