核酸分子光スイッチに基づく視覚化リアルタイムポリメラーゼ増幅検出法

DENG Fan ,  

SUN Na-na ,  

ZHOU Kai-yue ,  

LIU Jiang-hua ,  

LI Guo-liang ,  

XU Qin-feng ,  

FENG Xia ,  

摘要

本研究では、核酸分子の「光スイッチ」[Ru(bpy)2(dppz)]2+を蛍光色素としてリアルタイム蛍光RPA増幅に応用し、食源性病原菌(黄色ブドウ球菌(S.aur)およびサルモネラ(S.spp)など)に対する単一および多重リアルタイム蛍光RPA増幅検出を実現した。さらに、[Ru(bpy)2(dppz)]2+を基にした迅速で視覚化可能なRPA検出法を確立し、この方法は増幅産物DNAと[Ru(bpy)2(dppz)]2+の結合後に可視光下で発生する強い赤色蛍光信号を直接観察することで増幅結果を判定し、高濃度の[Ru(bpy)2(dppz)]2+による増幅反応の顕著な抑制を回避し、優れた視覚化検出効果を有し、高い特異性と感度を備え、環境モニタリング、食品安全、臨床診断の現場での迅速な核酸検出に広く応用が期待される。

关键词

リアルタイムポリメラーゼ増幅(RPA);[Ru(bpy)2(dppz)]2+;視覚化検出;黄色ブドウ球菌

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