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タンパク質ゲル電気泳動オンライン分析方法の研究
FAN Shuai-qiang
,
YOU Qing-xiang
,
ZENG-yuan
,
YANG Bo
,
MA Ming-yuan
,
ZHANG Da-wei
,
LI Zhen-qing
,
DOI:
10.12452/j.fxcsxb.25011739
摘要
実験室で開発されたタンパク質電気泳動分析装置に基づき、本論文ではタンパク質分子のSDS-PAGEによる分離および分子量と濃度のオンライン分析を実現する方法を提案した。10.5〜107 kDaのタンパク質マーカーに対して電気泳動を行い、オンラインでそのゲル電気泳動画像を取得し、グレースケール値とタンパク質分子濃度の関係を分析した。結果として、本装置は30分以内に107 kDa未満のタンパク質サンプルの迅速な分離を実現でき、紫外線照射5分で各タンパク質バンドの蛍光強度がピークに達した。10.5〜107 kDaの範囲内で、その移動距離は分子量に比例し、相関係数は0.93に達した。20.1 kDa以上のタンパク質分子については、蛍光強度は0.72〜3.96 μg/μLの範囲で質量濃度と線形関係にあり、相関係数はいずれも0.988以上であった。開発したタンパク質電気泳動分析装置を用いて涙液中のタンパク質成分を分析し、免疫グロブリンA、ラクトフェリン、血清タンパク質、脂質運搬タンパク質およびリゾチームを成功裏に分離した。本研究はタンパク質分子の迅速検出装置の開発に重要な応用価値を持つ。従来のタンパク質ゲル電気泳動方法と比較して、開発したタンパク質電気泳動分析装置はタンパク質の電気泳動時間を1.5時間以上から30分以内に短縮できる。本研究はタンパク質分子の迅速検出装置の開発に重要な応用価値を持つ。
关键词
タンパク質; ドデシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミドゲル電気泳動; 蛍光染料; 涙液
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