従来の指数増幅では、標的核酸と対称増幅テンプレートの両端のエネルギーは同じですが、標的核酸がテンプレートの5’端とハイブリッドすると増幅が困難になり、痕跡量の標的核酸の解析が制限されます。本稿では、非対称ハイブリッド誘導定温指数増幅（AEXPRA）戦略を開発し、microRNAの高感度・迅速な解析に用いました。miR-196bを標的とし、設計された非対称増幅テンプレートに基づき、標的物は増幅テンプレートの3’端に完全相補的ですが、5’端には部分的に相補的であるため、miR-196bは増幅テンプレートの3’端に完全にハイブリッドできます。本法は高感度、高特異性、速さを有し、反応時間は30分以内で、0.42 amol/LまでのmiR-196bを検出可能です。実用性確認のため血清抽出物中のmiR-196b分析に適用し、非小細胞癌患者と正常者血清中のmiR-196b発現を有効に区別でき、結果はリアルタイム定量PCR（RT-qPCR）と一致しました。本法は高精度かつ信頼性が高く、miRNAの臨床診断および病理研究において重要な役割を果たすことが期待されます。

定温指数増幅;マイクロRNA;蛍光検出;疾病診断