フローサイトメトリー蛍光免疫法に基づく食品中のペニシリル酸含量の検出

LU Yi-na ,  

SU You-zhi ,  

CHENG Tie-yuan ,  

XU Juan ,  

YI Xiong-hai ,  

LIU Jun ,  

LI Zhi-xiong ,  

LI Guan-si ,  

摘要

ペニシリル酸(BA)含量を定量的に検出するためのフローサイトメトリー蛍光免疫法を確立した。まず、合成したBA-BSA完全抗原により、高価値の抗BAモノクローナル抗体を免疫獲得した。次に、BA-BSA合成抗原をフィコエリスリンで標識し、サンプル中のBAと蛍光微球に結合した抗BAモノクローナル抗体との競合結合を行い、フローサイトメトリー蛍光計で微球表面の平均蛍光強度を検出することで、サンプル中のBAの定量測定を実現した。BAの直線範囲は1.01〜97.96 μg/L、半数抑制濃度(IC50)は9.92 μg/L、相関係数(r2)は0.9998、検出限界は0.56 μg/kgであった。添加回収率は90.4%〜104%、相対標準偏差は5.0%〜9.8%であった。方法の特異性は良好で、オクラトキシンA、アフラトキシンB1、アフラトキシンM1、フモニシンB1、フモニシンB2との交差反応率はいずれも0.1%未満であった。実際のサンプル測定結果は高速液体クロマトグラフィータンデム質量分析法の結果と一致した。本確立したフローサイトメトリー蛍光免疫法は簡便、迅速、高感度、高精度であり、各種食品などの複雑なマトリックス中の他の真菌毒素の分析および検出に応用可能である。

关键词

フローサイトメトリー蛍光免疫法; ペニシリル酸; 抗原; 抗体; 食品安全

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