ゲル電気泳動チップに基づくDNA定量分析方法の研究

LI Zhen-qing ,  

CHEN Qin ,  

ZHU Jian-dong ,  

ZENG Yuan ,  

ZHANG Da-wei ,  

Yamaguchi Yoshinori ,  

摘要

ゲル電気泳動後のバンド中のDNAの長さと濃度を特定するために、本論文ではDNAの蛍光強度を用いてDNAの長さと濃度を正確に分析する有効な方法を提案した。D2000 DNAラダーを用いてゲル電気泳動を行い、画像を取得して処理した。蛍光強度とDNA濃度の間の線形関係および移動距離とDNA長さの間の線形関係を用いてデータ分析を行った。結果は以下の通りである:SYBR Green Iを蛍光染料として用いたDNAの電気泳動において、画像の各ピクセルの緑色および赤色のグレースケール値はDNAの特徴情報を反映しており、緑色のグレースケール値は赤色よりも明らかに高かった。2000 bp未満のDNA断片については、分子量と移動距離は反比例関係にあり、両者の対数を取ると相関係数は0.971となり、DNA分子量と移動距離の数学モデルを構築してDNA分子量を算出できる。電気泳動のピーク値とピーク積分面積を計算したところ、濃度比が2∶1の2つのDNAバンドの比率はそれぞれ2.16と1.96、2.11と1.94、2.16と1.93であり、電気泳動ピークの積分面積がDNAの実際の濃度値をより効果的に反映できることを示した。本研究は核酸ゲル電気泳動装置の開発に重要な応用価値を持つ。

关键词

核酸; ゲル電気泳動; 定量分析; バイオチップ

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