二次高調波発生（SHG）は、ラベル不要、低光毒性、材料構造への感度などの利点から多くの分野で応用されている。本論文では、生体内マウス皮膚モデルを用いて、二光子顕微鏡でのSHGイメージング条件を検討した。透明化試薬としてグリセロールを使用し、グリセロールおよび水処理後の皮膚のSHG信号強度とイメージング深度を統計解析した。グリセロール処理群は水処理群とSHG信号強度およびイメージング深度に有意差（*p ≤ 0.05）が認められ、高効率な透明化試薬として生体内皮膚実験に適することを示した。レーザー出力、生体組織の自発蛍光特性、イメージング深度という3つの観点から検討し、二光子顕微鏡SHGイメージングの最適励起波長は900 nmであると導いた。グリセロール透明化と最適励起波長を用いて腫瘍皮膚のSHG信号を取得し、腫瘍が皮膚のコラーゲン繊維構造に与える影響を生体内で観察することに成功した。結果は、二光子顕微鏡がSHGイメージングを効果的に行い、生体内でのコラーゲン繊維構造の観察と可視化研究を実現することを示している。

二光子顕微鏡;二次高調波発生;腫瘍;コラーゲン