F68-Ce-Cu過酸化物酶活性調節に基づく類たばこ製品中のニコチン検出

CHEN Dan ,  

WANG Chun-qiong ,  

ZHANG Ke ,  

RONG Xian-fang ,  

LONG Jie ,  

LI Hai-yan ,  

CAI Jie-yun ,  

CHEN Zhi-chao ,  

CUI Yi-fan ,  

YANG De-zhi ,  

YANG Ya-ling ,  

摘要

過酸化物酶活性を有するセリウムおよび銅ドープナノザイム(F68-Ce-Cu)を調製し、「茶煙」、「花煙」などの類たばこ製品中のニコチンの比色分析に用いた。H2O2存在下で、F68-Ce-Cuは無色の3,3',5,5'-テトラメチルベンジジン(TMB)を青色酸化型TMB(oxTMB)へ触媒変換できる。研究により、ニコチンがF68-Ce-Cuの過酸化物酶活性を顕著に増感し、類たばこ製品中の他成分の干渉を受けないことが分かった。ミカエリス動力学の研究結果は、単独のCe(Km=2.04 mmol/L)またはCu(Km=9.46 mmol/L)ドープナノザイムと比較して、F68-Ce-Cuのミカエリス定数Kmが有意に低下(Km=1.51 mmol/L)し、天然ニコチンを添加すると「F68-Ce-Cu+ニコチン」のKmは0.25 mmol/Lとなり、基質親和性が6倍増加したことを示した。ゼータ電位測定の結果、F68-Ce-Cuとニコチンとの間に強い吸着作用があり、より多くの·OHおよびO2·-の生成を促進し、過酸化物酶活性を著しく向上させることが示された。0.017〜0.52 mg/mLの範囲で、ニコチンの質量濃度は654 nmでの吸光度と良好な線形関係を示し、検出限界は0.008 mg/mLであった。実際の類たばこ製品において、この方法の加標回収率は90.9%〜103%、相対標準偏差は2.1%〜4.6%であり、高速液体クロマトグラフィー法の検出結果とほぼ一致し、本方法の安定性と正確性の高さを示している。

关键词

ニコチン; 類たばこ製品; ナノザイム; 過酸化物酶; 比色検出

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