Détermination de la teneur en collagène de type I bovin par chromatographie liquide à haute performance couplée à la spectrométrie de masse

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摘要

Une méthode basée sur la chromatographie liquide à haute performance couplée à la spectrométrie de masse, utilisant un peptide caractéristique, a été établie pour détecter la teneur en collagène de type I bovin. Les échantillons d'éponge de collagène ont été digérés enzymatiquement avant séparation chromatographique, et mesurés par spectrométrie de masse en mode de surveillance d’ion unique dépendant du temps de rétention (SIM), avec quantification par étalonnage externe. Le peptide caractéristique obtenu par digestion spécifique à la trypsine est GFSGLDGAK. Ce peptide présente une bonne linéarité dans la plage de concentration massique de 0,645 à 21,5 μg/mL (r2=0,9994) ; la limite de quantification est de 6,45×10-4 μg/mL ; aux trois niveaux d’ajout de 3,10, 2,48 et 1,55 μg/mL, le taux moyen de récupération est de 98,2 % à 102 % ; la déviation standard relative de la surface du pic (n=6) est de 0,80 %. Les échantillons d’éponge de collagène ont été soumis à des tests d’homogénéité, de stabilité et de quantification, assurant la validité de la méthode et vérifiant la qualité du produit, avec une teneur en collagène de type I bovin mesurée à (0,926±0,014) mg/mg. La méthode est simple, rapide, avec une bonne reproductibilité et stabilité élevée, permettant une quantification efficace du collagène de type I bovin.

关键词

chromatographie liquide à haute performance-spectrométrie de masse (HPLC-MS); peptide caractéristique; collagène de type I bovin; quantification

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