Une méthode d'analyse métabolomique rénale basée sur la chromatographie liquide haute performance couplée à la spectrométrie de masse à très haute résolution a été établie. Les tissus rénaux ont été broyés en poudre dans de l'azote liquide, puis extraits avec un système de solvants éther méthyl tert-butyl/méthanol/eau, obtenant respectivement des fractions à forte polarité (couche inférieure) et à faible polarité (couche supérieure). Après séparation par élution en gradient sur une colonne chromatographique HILIC hydrophile et une colonne inverse C₁₈, une analyse par spectrométrie de masse à haute résolution a été effectuée. Une source d'ionisation par électrospray (ESI), modes ioniques positifs et négatifs, balayage en mode scan complet, plage de 100 à 1000 Da, résolution de 120 000 ont été utilisés. Les résultats montrent que la méthode est très sensible, spécifique et stable, permettant l'acquisition simultanée d'informations sur les métabolites fortement et faiblement polaires dans les tissus rénaux, fournissant une nouvelle méthode pour la découverte de biomarqueurs des maladies rénales et de la néphrotoxicité médicamenteuse.

Chromatographie liquide haute performance - spectrométrie de masse à très haute résolution; métabolomique; rein; préparation des échantillons