Étude des performances du micro-réacteur à trypsine en chromatographie électrophorétique capillaire à matrice d'oxyde de graphène

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摘要

Basé sur les excellentes propriétés physico-chimiques du graphène, une méthode d'assemblage en couches a été utilisée pour modifier la paroi intérieure d'un capillaire en quartz avec un oxyde de graphène, préparant ainsi une chromatographie électrophorétique capillaire à matrice d'oxyde de graphène. Elle a été caractérisée par électroosmose, spectroscopie Raman, etc. Sur cette base, la trypsine a été immobilisée à la tête de la colonne capillaire par liaison ionique pour préparer un micro-réacteur à trypsine. La combinaison des deux constitue un micro-réacteur à trypsine en chromatographie électrophorétique capillaire. Les résultats expérimentaux montrent que l'oxyde de graphène en tant que matrice améliore à la fois l'efficacité de séparation de l'échantillon et favorise la performance catalytique de la trypsine. La résolution de la séparation du mélange de N-benzoyl-L-arginine éthylester chlorhydrate (BAEE) et de N-benzoyl-L-arginine (BA) est passée de 3,70 dans le capillaire nu à 4,71 dans le capillaire modifié par oxyde de graphène, tandis que l'activité enzymatique immobilisée (constante de Michaelis Km = 1,10 mmol/L, vitesse maximale Vmax = 0,32 mmol/L/s) était également nettement supérieure à celle du capillaire nu (Km = 109,77 mmol/L, Vmax = 0,00046 mmol/L/s). En utilisant ce micro-réacteur, les composés actifs inhibiteurs de la trypsine ont été sélectionnés à partir de 10 plantes médicinales chinoises, révélant la présence d'inhibiteurs de la trypsine dans le Sanqi et le Da Huang.

关键词

Micro-réacteur enzymatique; Oxyde de graphène; Chromatographie électrophorétique capillaire; Trypsine; Inhibiteurs

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