Étude de la libération en temps réel des ROS cellulaires basée sur la microscopie électrochimique à balayage

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摘要

Cette étude utilise la technique de microscopie électrochimique à balayage (SECM) pour examiner en temps réel les variations des espèces réactives de l'oxygène (ROS) dans les cellules de cancer du poumon (A549) stimulées par l'acétate de tétradécanoyl phorbol (PMA). Le peroxyde d'hydrogène (H2O2) a été utilisé comme cible détectable, permettant d'obtenir des images de la réponse électrochimique au stress oxydatif cellulaire. En utilisant le chlorure de ruthénium hexamine (Ru(NH3)6Cl3) comme milieu de système et la technique de rétroaction négative du courant, des images claires de la morphologie cellulaire ont été obtenues, avec une optimisation de la distance de détection entre la sonde et le substrat. Lorsque le potentiel de la sonde a été fixé au potentiel de réduction du peroxyde d'hydrogène (-0,65 V), l'imagerie de courant a permis d'observer la libération en temps réel des ROS, réalisant une détection instantanée lors de la stimulation des cellules A549 par PMA. L'agrandissement de la zone de balayage a permis d'obtenir des images SECM des libérations de ROS par différentes cellules individuelles, permettant une capture en temps réel et une reproductibilité du signal ROS. Les résultats montrent que le PMA perturbe l'équilibre dynamique des espèces oxygénées cellulaires, induisant une réponse de stress oxydatif. En plaçant la sonde au niveau du site de libération des ROS cellulaires et en détectant la variation du courant au fil du temps, on observe une fluctuation du courant, suggérant que la libération extracellulaire des ROS est un processus pulsatile dynamique.

关键词

Microscopie électrochimique à balayage (SECM); Espèces réactives de l'oxygène (ROS); H2O2; Cellules

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