Analyse des métabolites des acides biliaires dans le sérum des patients atteints de diabète de type 2 basée sur UPLC-MS/MS

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摘要

Application d'une méthode métabolomique basée sur la chromatographie liquide ultra-performante couplée à la spectrométrie de masse en tandem (UPLC-MS/MS) pour détecter le profil métabolique des acides biliaires dans le sérum des patients atteints de diabète de type 2, afin d'obtenir des biomarqueurs métaboliques et de découvrir des cibles potentielles de prévention et de traitement prédictif du diabète. La séparation a été réalisée avec une colonne Waters ACQUITY UPLC BEH C18 (150 mm × 2,1 mm, 1,7 μm), avec une phase mobile composée d'une solution aqueuse à 0,05% d'acide acétique et d'acétonitrile, sous un débit de 0,40 mL/min en élution en gradient. Cette méthode a permis de déterminer le profil métabolique des acides biliaires dans le sérum de 30 patients diabétiques et de 50 sujets normaux. Quarante et un standards d'acides biliaires ont été bien séparés en moins de 30 minutes, chaque composant présentant une excellente linéarité dans une certaine plage de concentration, avec des limites de détection (LOD) comprises entre 0,24 et 7,81 nmol/L, des limites de quantification (LOQ) entre 0,49 et 15,63 nmol/L, et des coefficients de corrélation (r2) allant de 0,9867 à 0,9997. Le profil métabolique des acides biliaires dans le sérum montrait une corrélation entre les deux groupes. L'analyse par orthogonal partial least squares discriminant analysis (OPLS-DA) a révélé que 12 acides biliaires (incluant l'acide glycoursodésoxycholique, l'acide glycocholique, l'acide tauro-ursodésoxycholique, l'acide cholique, l'acide désoxycholique, l'acide glycoursodésoxycholique, l'acide glycodésoxycholique, l'acide 12-cétolithocholique, l'acide ursodésoxycholique, l'acide désoxycholique, l'acide isocholique et l'acide cholique) portaient des informations importantes pour la classification des groupes. En combinant l'analyse des courbes ROC (caractéristiques opérationnelles du récepteur) des sujets, six biomarqueurs métaboliques des acides biliaires ont été finalement identifiés : l'acide tauro-ursodésoxycholique (AUC=0,68), l'acide glycoursodésoxycholique (AUC=0,66), l'acide glycoursodésoxycholique (AUC=0,63), l'acide cholique (AUC=0,63), l'acide désoxycholique (AUC=0,63) et l'acide glycodésoxycholique (AUC=0,58), qui ont une valeur potentielle en recherche scientifique et en clinique pour le diagnostic précoce et l'étude approfondie du diabète.

关键词

chromatographie liquide ultra-performante couplée à la spectrométrie de masse en tandem (UPLC-MS/MS); métabolisme des acides biliaires; diabète de type 2; sérum

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