Une méthode analytique utilisant la chromatographie liquide ultra-performante couplée à la spectrométrie de masse en tandem à triple quadrupôle (UPLC-MS/MS) a été établie pour déterminer l'α-lactalbumine (α-La) et la β-lactoglobuline (β-Lg) dans la poudre de protéine de lactosérum. L’échantillon a été alkylé à l'iodoacétamide, puis digéré par la trypsine alcaline. La séparation a été effectuée sur une colonne Waters ACQUITY UPLC-BEH C18, 300 , avec une phase mobile composée d'eau avec 0,1 % d'acide formique et d'acétonitrile avec 0,1 % d'acide formique, en élution par gradient, avec détection en mode MRM (monitoring multiple des réactions) des ions positifs, la quantification étant réalisée par méthode de l'étalon interne. Les résultats montrent que l'α-lactalbumine et la β-lactoglobuline présentent une relation linéaire satisfaisante dans les plages de 40 à 1 000 nmol/L et 80 à 2 000 nmol/L respectivement, avec une limite de quantification (S/N=10) de 0,020 g/100 g; le taux de récupération des ajouts est compris entre 84,7 % et 95,6 %, avec un écart type relatif (RSD, n=6) entre 1,6 % et 5,8 %. Cette méthode a été appliquée pour mesurer la teneur et comparer les différences dans 4 types de poudre de protéine de lactosérum (poudre de lactosérum désalée D70 et D90, poudre concentrée de protéine de lactosérum et poudre d'α-lactalbumine) provenant de 5 pays. La méthode est simple à manipuler, précise, et peut être utilisée pour la détermination de l'α-lactalbumine et de la β-lactoglobuline dans des matières premières protéinées telles que la poudre de protéine de lactosérum.

Chromatographie liquide ultra-performante couplée à la spectrométrie de masse en tandem à triple quadrupôle;α-lactalbumine;β-lactoglobuline;poudre de protéine de lactosérum