Basée sur la chromatographie bidimensionnelle hors ligne et l'analyse des exoglycosidases, une méthode efficace et fiable pour l'identification de la structure des chaînes N des glycoprotéines a été établie. Tout d'abord, une chromatographie par échange d'anions faibles a été utilisée pour préparer des chaînes glycosylées avec différents degrés de sialylation, puis une électrophorèse capillaire à induction laser avec fluorescence (CE-LIF) a été combinée aux exoglycosidases pour l'identification structurale des chaînes glycosylées. Après marquage fluorescent des chaînes séparées, une digestion descendante (top-down digestion) et une attribution structurale ascendante (bottom-up identification) ont été réalisées, détectant au total 18 types de glycanes dans l'IgG. Cette stratégie a été appliquée pour analyser les chaînes N dans le sérum humain, révélant que les quantités relatives des chaînes avec différents degrés de sialylation sont S1∶S2∶S3∶S4=4.7∶20.9∶6∶1. Les résultats montrent que les chaînes neutres à abondance élevée dans le sérum humain sont très similaires à celles de l'IgG, et que le glycan N le plus abondant dans le sérum est le FA2G2S2 disialylé à deux antennes. Cette méthode présente un certain potentiel d'application dans la caractérisation structurale des chaînes N des glycoprotéines.

chromatographie bidimensionnelle hors ligne; électrophorèse capillaire; immunoglobuline G; chaînes N; sérum humain