Stratégie de croissance de l’ADN sur interface nano basée sur la transférase terminale de désoxynucléotidyl et étude de construction d’un capteur aptamère pour l’énrofloxacine

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摘要

Après assemblage de l’ADN thiolé à la surface des nanoparticules d’or (AuNPs) pour préparer une sonde biologique AuNPs-ADN, la transférase terminale de désoxynucléotidyl (TdTase) catalyse la croissance de l’ADN au niveau de l’extrémité 3′-OH de la sonde, produisant ainsi des longues chaînes simples d’ADN (ssDNA). La sonde et le ssDNA ont été caractérisés par électrophorèse sur gel d’agarose et microscopie à force atomique (AFM), montrant que TdTase permet une croissance efficace de l’ADN à l’interface nano avec des chaînes atteignant une longueur de 850 nm. Puis cette stratégie de croissance d’ADN a été combinée avec la technique des aptamères. D’abord, le fragment aptamère 1 a été assemblé sur la surface de l’or nanométrique, et le fragment aptamère 2 a été assemblé sur des billes magnétiques fonctionnalisées à l’aldéhyde, construisant ainsi un biosenseur aptamère ciblant l’énrofloxacine (ENR). Ce biosenseur montre une bonne réponse à l’ENR dans une plage de 10 à 1,0×10^5 ng/mL, avec une limite de détection de 1,0 ng/mL, et distingue clairement les signaux de groupes témoins tels que la ciprofloxacine, l’ofloxacine et la norfloxacine. L’étude démontre que le capteur aptamère basé sur TdTase est facile à utiliser, possède une bonne réponse moléculaire spécifique et peut offrir de nouvelles pistes de recherche dans des domaines tels que la sécurité alimentaire.

关键词

sonde biologique nano; transférase terminale de désoxynucléotidyl (TdTase); croissance de l’ADN; capteur aptamère; énrofloxacine

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