Avec le développement des médicaments à base d'anticorps tels que les anticorps monoclonaux et bispécifiques, l'élimination des agrégats, des protéines des cellules hôtes et des sous-produits structurellement similaires lors des processus de purification en aval fait face à des défis accrus. Bien que la chromatographie d'affinité à la protéine A/G permette une capture hautement sélective des anticorps, sa capacité à distinguer les monomères d'anticorps, les agrégats et les sous-produits structurellement similaires est limitée, nécessitant des étapes de purification orthogonales avec sélectivité spécifique. Ces dernières années, la chromatographie en mode mixte échange cationique/interaction hydrophobe (CEX/HIC) a suscité un intérêt en raison de sa capacité à exploiter simultanément les interactions électrostatiques et hydrophobes en milieu aqueux. Cet article se concentre sur la conception de la phase stationnaire CEX/HIC, passe en revue ses mécanismes multiples de rétention ainsi que l'influence de la matrice, la structure poreuse, le bras de liaison, la composition du ligand et la méthode d'immobilisation sur l'adsorption, l'élution et la sélectivité de séparation des protéines. En s'appuyant sur des exemples de purification d'anticorps monoclonaux et bispécifiques, il résume leur application dans l'élimination des agrégats, des protéines des cellules hôtes et des sous-produits structurellement similaires. Cet article peut servir de référence pour la conception de milieux et l'optimisation des procédés de purification des anticorps.

chromatographie en mode mixte; échange cationique; interaction hydrophobe; conception du ligand; anticorps monoclonaux; anticorps bispécifiques