Méthode de chromatographie liquide ultra-performance couplée à la spectrométrie de masse en tandem pour la détermination de 13 médiateurs lipidiques monohydroxylés chez des rats normaux et des modèles de rats atteints d'arthrite rhumatoïde

JIN Bo ,  

CHEN Yi-yang ,  

LIANG Ya-jing ,  

HU Xue-xin ,  

MA Chen ,  

摘要

Cet article établit une méthode de chromatographie liquide ultra-performance couplée à la spectrométrie de masse en tandem (UPLC-MS/MS) pour déterminer le contenu de 13 médiateurs lipidiques monohydroxylés dans les tissus cardiaque, hépatique, splénique, pulmonaire et rénal de rats normaux et de modèles de rats arthritiques rhumatoïdes, comprenant 7 types d'hydroxy-eicosatétraénoïque (HETE) et 6 types d'hydroxy-docosahexaénoïque (HDHA). La préparation des échantillons utilise une extraction liquide-liquide avec de l'acétate d'éthyle contenant du 2,6-di-tert-butyl-4-méthylphénol (BHT) comme solvant d'extraction. La validation méthodologique indique que les limites de détection (LOD) des 13 analytes sont comprises entre 0,1 et 1,0 ng/mL, et les limites de quantification (LOQ) entre 0,5 et 2,0 ng/mL. La plage linéaire des analytes, à l'exception du 4-HDHA, est comprise entre le LOQ et 1000 ng/mL, avec des coefficients de corrélation supérieurs à 0,99. Les taux de récupération des 13 analytes à trois niveaux d'ajout varient de 82,5 % à 118 %, avec un écart type relatif (RSD) inférieur à 7,5 %. La précision intra-journalière est inférieure à 5,0 %, la précision inter-journalière inférieure à 6,0 %. Les solutions d'échantillons sont stables à température ambiante pendant 3 heures et à 4 °C pendant 72 heures. Cette méthode est sensible, précise et reproductible. Elle a été appliquée pour détecter le contenu des 13 médiateurs lipidiques monohydroxylés dans différents tissus de rats normaux et arthritiques rhumatoïdes. Les résultats montrent une distribution significative différente des médiateurs lipidiques monohydroxylés dans divers organes de rats normaux. Chez les rats arthritiques rhumatoïdes, la majorité des HETE et HDHA dans les tissus cardiaque, hépatique, pulmonaire et rénal tendent à augmenter, suggérant que l'arthrite rhumatoïde peut induire des modifications métaboliques inflammatoires dans différents organes.

关键词

Chromatographie liquide ultra-performance - spectrométrie de masse en tandem; médiateurs lipidiques monohydroxylés; arthrite rhumatoïde; hydroxy-eicosatétraénoïque; hydroxy-docosahexaénoïque

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