Étude d'un capteur par diffusion dynamique de la lumière pour la détection de l'aflatoxine M1 basé sur la technologie d'amplification par échange de chaîne

FAN Tao ,  

CUI Hao ,  

XIA Tao ,  

WU Bao-zhu ,  

LI Ting-ting ,  

摘要

Cette étude a innové en développant un système de détection par diffusion dynamique de la lumière (DLS) simple, peu coûteux et à haute sensibilité, combiné à une amplification par échange de chaîne enzymatique (NESDA) pour la détection de l'aflatoxine M1 (AFM1). En présence d'AFM1, la séquence contenant l'aptamère AFM1 s'hybride partiellement avec l'ADN amorce, déclenchant la réaction NESDA et produisant une grande quantité d'ADN simple brin (ssDNA). L'ADN simple brin produit s'hybride avec des sondes à ADN liées à des nanoparticules d'or, provoquant l'agrégation des nanoparticules et une augmentation de leur diamètre hydrodynamique moyen. Ce changement peut être détecté par DLS et analysé quantitativement. Pour améliorer la performance de la détection, le système a étudié l'influence des paramètres clés tels que la température de la réaction NESDA, la durée d'incubation, la concentration de l'ADN matrice, ainsi que les quantités de polymérase et d'endonucléase ajoutées sur le signal de détection. Les résultats expérimentaux ont montré qu'en conditions optimales, le diamètre moyen des nanoparticules d'or présente une bonne relation linéaire avec la concentration d'AFM1 dans la plage de 8,3 à 1000 pmol/L, avec une limite de détection aussi basse que 1,3 pmol/L. La méthode a été appliquée avec succès à la détection d'AFM1 dans des échantillons de lait commerciaux, avec un taux de récupération ajouté de 94,3% à 107%, confirmant la fiabilité de l'application pratique et offrant de larges perspectives d'utilisation future dans l'évaluation de la sécurité alimentaire.

关键词

Aflatoxine M1; technologie d'amplification par échange de chaîne; technologie de diffusion dynamique de la lumière; endonucléase; nanoparticules d'or; lait

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