Système de biosenseur sans cellule à sortie de signal ADN basé sur un mutant de l’ARN polymérase T7

LAI Ru-hui ,  

SHU Liu ,  

HUANG Yan ,  

NIE Zhou ,  

LEI Chun-yang ,  

摘要

Cette étude propose une nouvelle stratégie de biosenseur sans cellule basée sur la conversion du paradigme du vecteur de signal. En introduisant le mutant de l’ARN polymérase T7 QMF-M6, capable d’utiliser efficacement les dNTP pour synthétiser de l’ADN simple brin, dans un système de régulation transcriptionnelle centré sur un facteur de transcription allostérique (aTF), elle réalise la transformation d’un vecteur de signal ARN en une molécule de rapporteur ADN stable, améliorant ainsi de manière significative la robustesse et la résistance aux interférences du système de détection. Les résultats expérimentaux montrent que cette plateforme présente d’excellentes performances de détection pour la tétracycline et les ions cuivre, avec des limites de détection de 0,62 μmol/L et 26 nmol/L respectivement, et une bonne applicabilité dans des expériences de récupération d’ions cuivre dans des échantillons d’eau environnementale. Cette étude propose une stratégie de sortie de signal ADN pour résoudre l’instabilité des systèmes rapporteurs, fournissant une voie technique viable pour le développement de systèmes de biosenseurs sans cellules robustes adaptés à la surveillance sur site et au diagnostic immédiat.

关键词

Biosenseur sans cellule;Facteur de transcription allostérique;ARN polymérase T7;ADN

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