Système de biosenseur cellulaire sans cellules à sortie de signal ADN basé sur un mutant de l’ARN polymérase T7

LAI Ru-hui ,  

SHU Liu ,  

HUANG Yan ,  

NIE Zhou ,  

LEI Chun-yang ,  

摘要

Cette étude propose une nouvelle stratégie de biosenseur cellulaire basée sur la conversion du paradigme du vecteur de signal. En introduisant dans un système de régulation transcriptionnelle centré sur le facteur de transcription allostérique (aTF) une mutant de l’ARN polymérase T7 QMF-M6 capable d’utiliser efficacement les dNTP pour synthétiser de l’ADN simple brin, la conversion du vecteur de signal ARN vers une molécule rapporteur d’ADN stable est réalisée, renforçant ainsi de manière significative la robustesse et la résistance aux interférences du système de détection. Les résultats expérimentaux montrent que cette plateforme présente d’excellentes performances de détection du tétracycline et des ions cuivre, avec des limites de détection respectives de 0,62 μmol/L et 26 nmol/L, et une bonne applicabilité dans les expérimentations de récupération d’ions cuivre dans des échantillons d’eau environnementale. Cette étude propose une stratégie de sortie de signal ADN pour résoudre l’instabilité des systèmes rapporteurs, fournissant une voie technologique viable pour le développement de systèmes biosenseurs cellulaires robustes adaptés à la surveillance sur site et au diagnostic instantané.

关键词

Biosenseur sans cellules;Facteur de transcription allostérique;ARN polymérase T7;ADN

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