L’analyse de confirmation de l’exposition au HN a été réalisée par la détection des adduits HN-ADN formés après l’exposition animale au moutard azotée (HN). Des modèles d’exposition aux toxines ont été établis chez des rats Sprague-Dawley (SD) âgés de 6 semaines, pesant environ 200 g, par injection intrapéritonéale de solutions de moutarde azotée 1 (HN1), moutarde azotée 2 (HN2) et moutarde azotée 3 (HN3), avec des groupes exposés à différentes doses de HN (0,3 LD₅₀, 0,5 LD₅₀ et LD₅₀) et un groupe témoin avec solvant vide. La chromatographie liquide haute performance couplée à la spectrométrie de masse en tandem (HPLC-MS/MS) en mode surveillance de réactions multiples (MRM) a été utilisée pour quantifier les types et concentrations des adduits HN-ADN dans l'urine des rats. Les résultats ont montré que les 12 standards d’adduits HN-ADN présentaient une bonne linéarité dans la plage 0,02~500 ng/mL, avec des limites de détection (LOD) de 0,01~0,02 ng/mL et des limites de quantification (LOQ) de 0,02~0,05 ng/mL, la précision intra- et inter-lots, évaluée par l'écart type relatif (RSD), étant inférieure à 15%. Douze heures après l’exposition, les adduits HN-AN3, HN-GN7, HN-GO6 et HN-Bis-GN7 ont été détectés dans l'urine des rats, avec un ordre de concentration HN-GN7>HN-Bis-GN7>HN-AN3>HN-GO6. Les concentrations des quatre adduits étaient positivement corrélées avec la dose d’exposition et diminuaient progressivement avec le temps. L’application de la méthode HPLC-MS/MS pour détecter les adduits d'ADN dans l'urine animale après exposition au HN a permis une détection précoce non invasive, une traçabilité précise et une évaluation des lésions, offrant une base pour étudier les processus et mécanismes de réparation des dommages à l'ADN causés par le HN.

moutarde azotée;adduits d'ADN;biomarqueurs;analyse de traçabilité;chromatographie liquide haute performance-spectrométrie de masse en tandem