Cette étude est basée sur les nanocubes d'argent (Ag NCs) et la stratégie de clivage trans CRISPR/Cas13a pour construire un capteur SERS sur papier hydrophobe destiné à détecter le miR-943 dans le sérum des patients atteints d'infarctus cérébral (CI). Les Ag NCs ont été assemblés sur papier hydrophobe pour constituer une base SERS initiale, puis l'ADN simple brin (ssDNA) modifié avec la molécule signal Cy5 a été fixé sur la base SERS en papier hydrophobe via la liaison Ag—S, formant ainsi un capteur SERS sur papier hydrophobe. En présence de la cible miR-943, l'activité de clivage trans spécifique de CRISPR/Cas13a est activée, coupant non spécifiquement le ssDNA et éloignant Cy5 de la surface de la base SERS sur papier hydrophobe, ce qui entraîne une diminution de l'intensité du pic caractéristique de Cy5 à 1468 cm^-1. Ce capteur présente une bonne relation linéaire dans la plage de 10 amol/L à 10 pmol/L, avec un coefficient de corrélation r^2=0,986, une limite de détection (LOD) aussi basse que 1,55×10^-17 mol/L, et bénéficie d'une excellente spécificité et reproductibilité. Les résultats des échantillons cliniques sont globalement cohérents avec ceux de la PCR quantitative en temps réel (qRT-PCR). Cette méthode offre une solution fiable et prometteuse pour le diagnostic précoce et non invasif de l'infarctus cérébral.
关键词
diffusion Raman amplifiée en surface;infarctus cérébral;CRISPR/Cas13a;miARN;sérum;nanocubes d'argent (Ag NCs)