Dosage quantitatif des 26 acides biliaires dans le sérum par chromatographie liquide ultra-performante - spectrométrie de masse haute résolution

GUO Min ,  

ZHANG Zhi-hua ,  

YANG Qin ,  

WANG Gang ,  

WANG Lin-lin ,  

ZHAO Jian-xin ,  

摘要

Cette étude a établi une méthode d'analyse conjointe par chromatographie liquide ultra-performante à haute résolution de masse (UPLC-HRMS) pour la détection de 26 acides biliaires dans le sérum. Après un traitement préalable par précipitation des protéines des échantillons de sérum, une colonne chromatographique Phenomenex Kinetex C18 (2,1 mm × 100 mm, 2,6 μm) a été utilisée pour la séparation, avec une élution en gradient utilisant une solution aqueuse d'acétate d'ammonium 5 mmol/L et du méthanol comme phase mobile. Les données ont été collectées en mode ions négatifs par pulvérisation électrospray, la quantification étant effectuée par méthode d'étalonnage externe. La validation méthodologique a montré une bonne linéarité pour les 26 acides biliaires dans la plage de 0,04~1163,5 ng/mL, avec des coefficients de corrélation (r2) d'au moins 0,9990. Les limites de détection allaient de 0,01 à 0,86 ng/mL, les limites de quantification de 0,04 à 2,22 μg/mL, les taux de récupération allant de 68,1 % à 99,8 %, avec des écarts-types relatifs de 0,10 % à 10 %. Cette méthode convient à la détection précise des acides biliaires dans des échantillons de sérum d’origines diverses, fournissant un support méthodologique fiable pour l’étude des mécanismes métaboliques des acides biliaires et la sélection de biomarqueurs de maladies associées.

关键词

sérum;acides biliaires;UPLC-HRMS;analyse quantitative

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