Une méthode de chromatographie liquide haute performance avec détecteur différentiel de réfraction (HPLC-RID) a été établie pour la détermination simultanée de la teneur en 4 agents protecteurs et 2 nutriments dans un cryoprotecteur vitrifié. Une solution d'acide sulfurique à 0,01 mol/L a été utilisée comme phase mobile pour l'élution, la séparation a été réalisée sur une colonne chromatographique BIO-RAD Aminex HPX-87H (300 mm×7,8 mm, 9 μm), la détection s'est faite par détecteur différentiel de réfraction (RID), la quantification par méthode de l'étalon externe. Les résultats montrent que sous des conditions chromatographiques optimisées, les 6 composants à tester sont efficacement séparés, avec une bonne linéarité dans la plage de concentration étudiée avec un coefficient de corrélation (r) d'au moins 0,9999, les limites de détection (LOD) et de quantification (LOQ) sont respectivement de 0,009~0,025 mg/mL et 0,030~0,085 mg/mL. Le taux moyen de récupération additionnelle des échantillons négatifs à trois niveaux de concentration (faible, moyen, élevé) est compris entre 99,8 % et 103 %, l'écart-type relatif (RSD, n=3) est de 0,20 % à 1,8 %. Cette méthode est simple, sélective, précise et convient à la détermination de la teneur en agents protecteurs et nutriments dans le cryoprotecteur vitrifié.

chromatographie liquide haute performance avec détecteur différentiel de réfraction; cryoprotecteur vitrifié; congélation des embryons; agents protecteurs; nutriments