Capteur électrochimique à aptamère marqué en tandem par quadruplex G pour la détection de l'adénosine

JIANG Su-san ,  

WANG Zhi-qiang ,  

GUO Zhi-xuan ,  

PENG Qing-yue ,  

ZHOU Yu ,  

MAO Li ,  

SU Hui-lan ,  

摘要

La détection rapide de l'adénosine dans l'urine est d'une grande importance pour le dépistage de maladies comme les tumeurs, tandis que les méthodes actuelles présentent des inconvénients tels que des opérations complexes et une faible sensibilité. Cette étude propose un capteur à base d'aptamère marqué en tandem par la quadruplex G pour la détection rapide et sensible de l'adénosine dans l'urine. Tout d'abord, une double chaîne d'acide nucléique contenant l'aptamère de l'adénosine est covalemment modifiée sur la surface d'une électrode en carbone vitreux propre. En présence d'adénosine, elle se lie spécifiquement à l'aptamère (Apt), révélant ainsi une sonde d'amorces d'amplification par réaction en chaîne par roulement (Primer, P). Ensuite, P sert de matrice pour l'amplification par RCA, produisant rapidement une grande quantité de produits d'amplification riches en séquences répétées à base de G. Ces séquences répétées s'autoassemblent en structures quadruplex G (G4) en présence d'ions potassium, ce qui permet l'immobilisation supplémentaire de méthylène bleu (MB) pour renforcer le courant de réponse et améliorer la sensibilité de détection. Le processus de fabrication du capteur a été caractérisé par électrophorèse, voltammétrie cyclique et impédance électrochimique, ainsi que l'optimisation des conditions de détection de l'adénosine. Dans des conditions optimales, la plage de détection linéaire du capteur est de 1 fmol/L à 1 nmol/L, avec une limite de détection de 0,68 fmol/L. Le capteur présente également une bonne stabilité (RSD=5,4 %), reproductibilité (RSD=4,1 %) et sélectivité. Le taux de recouvrement de l'adénosine dans des échantillons d'urine frais est de 104 % à 105 %, avec un RSD de 1,5 % à 5,5 %. Ce biosenseur à base d'aptamère est simple à utiliser, sensible, spécifique et peu coûteux, promettant une détection rapide de l'adénosine dans l'urine humaine.

关键词

adénosine;aptamère;amplification par réaction en chaîne par roulement;quadruplex G;capteur électrochimique

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