Dans l'amplification isotherme traditionnelle par index, l'énergie aux extrémités de l'acide nucléique cible et du modèle d'amplification symétrique est identique, cependant, lorsque l'acide nucléique cible s'hybride avec l'extrémité 5’ du modèle, le déclenchement de l'amplification est difficile, limitant l'analyse des cibles en traces. Cet article développe une stratégie d'amplification isotherme par index induite par hybridation asymétrique (AEXPRA) pour une analyse rapide et à haute sensibilité des microARN. En prenant miR-196b comme cible, basée sur un modèle d'amplification asymétrique conçu, puisque la cible est complètement complémentaire à l'extrémité 3’ du modèle mais partiellement complémentaire à l'extrémité 5’, miR-196b peut s'hybrider entièrement à l'extrémité 3’ du modèle. La méthode présente une haute sensibilité, une grande spécificité et une rapidité. Le temps total de réaction est inférieur à 30 minutes et permet de détecter le miR-196b à des concentrations aussi basses que 0,42 amol/L. Pour vérifier la praticité, la méthode a été appliquée à l'analyse du miR-196b dans des extraits de sérum, distinguant efficacement l'expression de miR-196b chez des patients atteints de cancer du poumon non à petites cellules et des sujets normaux, avec des résultats cohérents avec la RT-qPCR. La méthode présente une haute précision et fiabilité, promettant un rôle important dans le diagnostic clinique et l'étude pathologique des miARN.

amplification isotherme par index;microARN;détection fluorescente;diagnostic des maladies