Une méthode basée sur la détection de peptides caractéristiques a été développée pour détecter les protéines allergènes dans les produits à base de crevettes par digestion à la trypsine / chromatographie liquide haute performance - spectrométrie de masse quadrupolaire à temps de vol. 700 μL de chlorure de guanidine à 6 mol/L et 700 μL de tampon tris(hydroxyméthyl)aminométhane-hydrochlorure (Tris-HCl) 50 mmol/L ont été utilisés respectivement comme agents de dénaturation des protéines. En optimisant le temps de digestion enzymatique et les peptides caractéristiques, il a été déterminé d'utiliser 50 mmol/L de dithiothréitol et 100 mmol/L d'iodoacetamide pour détruire et inhiber la formation des ponts disulfures, suivi d'une digestion par trypsine à 10 mg/mL dans un milieu faiblement alcalin contenant 100 μL de bicarbonate de sodium 500 mmol/L. La phase mobile utilisée était de l'acétonitrile et une solution aqueuse à 0,1% d'acide formique, la séparation étant réalisée sur une colonne Caprisil C₁₈-X (100 mm × 2,1 mm, 1,8 μm). L'ionisation s'est faite en mode ion positif avec une source d'ionisation électrospray double AJS (Dual AJS ESI), les données ont été acquises selon une méthode d'exclusion itérative des ions Auto MS/MS via un spectromètre de masse quadrupolaire à temps de vol. Sur la base de l'apparition des pics peptidiques, IQLLEEDLER a été sélectionné comme peptide caractéristique de la myosine, la quantification a été réalisée par méthode externe. Les résultats ont montré une bonne linéarité dans la plage linéaire avec un coefficient de corrélation (r²) de 0,9920, une limite de détection de 0,68 μg/L, une limite de quantification de 2,28 μg/L, et un taux de récupération des échantillons de 84,5 % à 101 % aux niveaux d'enrichissement de 2 et 10 mg/kg. Cette méthode présente un traitement simple, une haute sensibilité, une bonne reproductibilité, et une analyse qualitative et quantitative précise. Elle peut fournir un soutien technique pour la détection et l'identification des allergènes du crabe, ainsi qu'une référence méthodologique pour l'identification des composants d'origine animale basée sur les peptides caractéristiques des protéines.

Digestion à la trypsine; chromatographie liquide haute performance - spectrométrie de masse quadrupolaire à temps de vol; produits à base de crevettes; protéines allergènes; peptides caractéristiques