Cet article utilise des microsphères de polyacrylate à grand pore comme matrice et un monomère fonctionnel méthacrylate de glycidyle-méthyle-éthylé-diamine diacide (GMA-IDA) comme ligand. Par une réaction rédox, un support de chromatographie d'affinité métallique a été préparé. Tout d'abord, le monomère fonctionnel GMA-IDA a été synthétisé par réaction entre le groupe époxy du GMA et le groupe imino de l'IDA. Ensuite, par polymérisation par greffage via une réaction rédox, les doubles liaisons du monomère fonctionnel ont été greffées sur les microsphères polymères à grand pore. Enfin, dans une solution de nickel à 0,1 mol/L, le Ni²⁺ a été chélaté pour préparer le support FastSep-GMA-IDA-Ni. Les facteurs influençant la capacité d'adsorption des protéines pendant la polymérisation par greffage ont été étudiés : concentration du monomère fonctionnel, concentration de l'initiateur, pH, température, temps de réaction, etc., afin de déterminer les conditions optimales de préparation du support FastSep-GMA-IDA-Ni. En utilisant l'hémoglobine bovine comme protéine modèle, la capacité de liaison statique maximale du FastSep-GMA-IDA-Ni a atteint 47,97 mg/mL, soit environ 25,75% de plus que les supports commerciaux Ni. Le support FastSep-IDA-Ni préparé par couplage présentait une capacité de liaison statique de 12,518 mg/mL, bien inférieure à celle du FastSep-GMA-IDA-Ni préparé par greffage. De plus, le FastSep-GMA-IDA-Ni montrait une meilleure efficacité de transfert de protéines que les supports commerciaux. Il a été constaté qu'avec l'augmentation du contenu en nickel, la capacité de liaison statique des protéines du support FastSep-GMA-IDA-Ni préparé dans les mêmes conditions augmentait jusqu'à saturation. Les résultats montrent qu'avec l'augmentation de la capacité d'échange d'ions, le contenu en nickel chélaté augmentait également, atteignant un maximum de 104,06 μmol/mL. Le FastSep-GMA-IDA-Ni préparé a été utilisé pour séparer et purifier la protéine hémagglutinine (HA-His) exprimée par des cellules CHO, obtenant de bons résultats de séparation.

Support chromatographique d'affinité métallique; greffage; microsphères polymères; capacité de liaison des protéines; séparation et purification